elisa检测标本处理

 elisa检测标本处理:   

•  注意事项：

    收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在 4 ℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，将标本及时分装后放在 -20 ℃或-70 ℃ 条件下保存。避免反复冻融。标本2 -8 ℃ 可保存48 小时， -20℃ 可保存1 个月。 -70度可保存 6个月。部分**类标本需添加抑肽酶。

•  液体类标本：

    标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。 1ml 的 全血可得到 0.5ml 的血清或血浆。每个标本量收集体积＝ 100ul ×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。

•  血清：

    室温血液自然凝固 10-20 分钟后，离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 /分）。收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

◇血浆：

    应根据试剂盒的要求选择 EDTA 、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，加入 10 ％（ v/v）抗凝剂 (0.1M 柠檬酸钠或 1%heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20分钟后，离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 /分）。仔细收集上清。如有沉淀形 成，应再次离心。

◇尿液、胸腹水、脑脊液：

    用无菌管收集。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 /分）。仔细收集上清。如有沉淀形成，应再次离心。

◇细胞培养上清：

    检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 /分）。仔细收集上清。检测细胞内的 成份时，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀释细胞悬液，细胞浓度达到 100 万 /ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 /分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

◇组织标本：

    切割标本后，称取重量。加入一定量的 PBS ，缓冲液中可加入 1 μg/L 蛋白酶抑制剂或 50U/ml 的 Aprotinin （ 抑肽酶）。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右（ 2000-3000 转 /分）。仔细收集上清置于 -20 度或 - 70度保存，如有必要，可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测，其余冷冻备用。