**印迹（western blot），实时荧光定量Real Time PCR技术服务

**印迹（western blot）技术服务

◇样本制备

1. 悬浮细胞：取大约 1×10⁷个细胞，低速离心收集，弃去培养液，加入1ml PBS悬浮细胞，转入小离心管中，低速离心沉淀细胞，弃去PBS，放入-70℃冰箱保存。

2. 贴壁细胞：取大约1×10⁷个贴壁细胞，胰酶消化后加入PBS悬浮细胞，转入小离心管中，低速离心沉淀细胞，弃去PBS，放入-70℃冰箱保存。

3. 组织：采集新鲜组织（注意：生物体死亡后10分钟内取材料并保存好），组织块以PBS或生理盐水清洗干净，切为小块，放入-70℃冰箱中保存。

样本量：组织样本，质量大于100mg；细胞样本，细胞数大于1×10⁶；

◇蛋白质抽提：

实验对象为组织样品，取适量（250~500mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂（或核蛋白抽提试剂），匀浆后抽提总蛋白（或核蛋白）。实验对象为细胞样品（细胞培养），每份样品取1×10⁶～1×10⁷细胞，PBS清洗细胞，去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂（或核蛋白抽提试剂）抽提总蛋白（或核蛋白）。标本也可交给我们处理，组织标本每个10元，核蛋白或膜蛋白每个30元。

◇收费标准：

每张膜上做一种目的蛋白和相应的内参蛋白。每张膜上可以做8个样品。每张膜的费用是：1000元。一抗另计，抗体*好为进口单克隆抗体，我公司可代购，其它试剂免费。

◇服务时限：

收到样本和一抗之日起15-25个工作日提交实验结果。

实时荧光定量Real Time PCR技术服务

◇服务要求：

1. 客户只需提供新鲜的标本。样本量：组织样本，质量≥100mg；细胞样本，细胞数≥1×10⁷。或直接提供纯化好的DNA（大于5ug/样品）。

2. 请通过 E-mail 提供已知的全长基因序列。

3. 请提供尽可能详细的背景资料： DNA/ RNA 来源、丰度等。

◇样本制备及注意事项:

1. 组织培养细胞：沉淀细胞，用PBS 洗一次，再用少量的PBS 悬浮细胞，然后加5~10 倍体积的RNAlater 。4℃过夜后，-20℃长期保存。

2. 组织：采集新鲜组织（注意：生物体死亡后1分钟内取材料并保存好），快速简单切碎组织样品，任何一边的*大厚度不能大于0.5cm，然后将组织碎块放入到5 倍体积的RNAlater 中。4℃过夜后，-20℃长期保存。

用RNAlater保存的样品非常稳定，建议4℃运输，也可常温运输。

◇收费标准

1. RNA提取+反转录,每个样品80元

2. PCR反应：每个反应40元

3. 引物合成每条100元

◇服务时限

收到样本之日起15-25个工作日提交实验结果。

样本或者指标数多，价格优惠！E-mail：westang@163.com

电话：021-55229872 65333639 55229873 传真：021-55236695

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